原核蛋白定制表达服务

原核蛋白定制表达服务

原核蛋白表达系统一般以大肠杆菌为宿主细胞。由于细胞增殖快、表达量高、纯化方便、稳定性好、抗污染能力强和成本低等优势，原核蛋白表达系统最为成熟可靠，同时也是目前蛋白表达实验中最常用、最经济实惠的表达系统。

然而，原核蛋白表达系统也存在一些困难。比如，要表达的基因编码区密码子使用偏好或载体上调控元件与宿主菌不相容，导致目的蛋白无法表达或者表达量低，甚至虽然表达成功但是目的蛋白不可溶等。

金赛奥借助于业内领先的密码子优化软件以及我们拥有的十年以上蛋白质优化与表达纯化的经验，在原核表达的每一个环节都为您提供专业的技术保障，不仅确保您的目标蛋白的表达量，还可以根据您的需求确保高纯度的交付产品，让您专注于后续的实验！

原核蛋白定制表达服务内容

包括密码子优化、基因合成和亚克隆。
我们可以为客户提供多种常见的商业化载体，如pET、pCOLD等。此外，我们还利用强大的合成生物学元件构建功能，优化并改造了包括sumo、MBP、GST、Trx等促溶促表达标签的pSYNO 系列原核表达载体供您选择，详询support@gcellpro.com。
交付周期：10-20个工作日（取决于基因长度及复杂度）
交付内容：1管约2~5 µg干粉质粒DNA；1管甘油菌；测序验证报告1份，含.ab1格式测序峰图

保证序列正确的前提下，宿主菌对于表达效果的影响也非常明显。
金赛奥将重组质粒转化到多种表达宿主菌中，包括BL21(DE3)、 ArcticExpress(DE3)、Rosetta(DE3)pLySs、Rosetta-gami B(DE3) 等各有特色的菌株。转化后我们至少挑取6个阳性克隆质粒进行表达小试和优化。小试的过程中我们会优化测试适合于各种菌株的培养条件，包括温度、培养基、诱导剂种类、诱导时机和诱导量等因素。通过SDS-PAGE检测表达量和可溶性，提供是否放大以及放大规模的可行性建议。
交付周期：5个工作日
交付内容：小试验证报告1份，含SDS-PAGE胶原图

优化到合适表达条件基因，使用1L或更大的培养规模诱导表达重组菌。培养并诱导后，进行一步亲和纯化或离子交换，疏水及凝胶多步纯化（可选或多选）。默认SDS-PAGE检测纯度，Western blot检测正确性（可选，客户提供验证过的一抗）。
交付周期：10-15个工作日
交付内容：1-10mg重组蛋白以及纯化报告数据

对于有进一步特殊要求的蛋白，我们为您提供多种后期加工选择，包括纯化后蛋白的标签切除、过滤除菌、内毒素去除、冻干、N端测序等服务。对于您的特殊需求，我们经验丰富的工程师可以为您提供量身定制的后期服务。
交付周期：10个工作日
交付内容：请联系support@gcellpro.com确认

1. 表达载体构建(可选)
2. 表达条件的优化
3. 蛋白放大表达和纯化
4. 蛋白后期加工(可选)